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凝胶电泳实验中EB胶的危害及处理措施
点击次数:18184 发布时间:2010-08-08

凝胶电泳实验或其他核酸分离实验中,常用EB(Ethidiumbromide,EtBr)作非放射性的Marker,来识别和显示核酸条带。EB是一种深红色不易挥发的晶体,微溶于水。当被紫外线照射时能发出红褐色的荧光。尽管EB是一种的显色剂,但它的高危险性要求特殊的安全管理和回收流程。
人体危害
EB是一种强诱变剂(可能造成遗传性危害),直接接触有中等毒性。EB可以通过皮肤吸收,因此应当避免一切与EB的直接接触。EB对皮肤,眼睛,口腔和上呼吸道系统有刺激性作用。应将EB安全密封,并密闭存放于干燥避光处。
安全预防措施 良好的操作习惯可以降低危害接触。
在通风厨使用粉状或结晶EB时,或使用含EB的溶液或片剂时,为避免吸入EB,应避免与EB的直接接触。
为避免皮肤接触到溶液中的EB,应戴手套、实验服和防护镜,并勤换手套。
要告知EB使用者EB的危险性、正确使用及回收方法。此外,经培训的才能通过实验室化学卫生管理计划,获得CHP(thelaboratory’s ChemicalHygiene Plan)的证书。拥有该证书者才算是按标准操作使用EB。
在使用含EB类材料前需制订一份EB安全使用说明。
进入工作区域需佩戴防护镜并确认有可使用的洗眼及淋浴设施。
和其他化学药品一样,在EB的使用及放置房间内不准饮食。
使用后脱去手套及时洗手,彻底处理掉残留的EB。
在使用UV照射EB时,戴上紫外线防护镜或用紫外屏蔽玻璃以屏蔽。
紧急处理措施
误入眼睛措施:如果EB不慎落入眼睛,立即用大量的冷水冲洗至少15分钟。zui好能用洗眼药水进行擦洗。
误接触措施:如果皮肤不慎接触到EB,立即脱去被污染的衣物。再用肥皂清洗接触到的皮肤后,大量的冷水冲洗至少15分钟。
误服措施:如果不慎误服或吸入EB,将受害者移至通风处,并及时送医救治。
泄漏污染处理:如果EB不慎洒落在水槽或者下水道,请立刻告知相关管理部门。如果大量EB洒落,应立即通知在该工作域的所有人员,将人员疏散并开始清理被污染的区域。在未清理好现场的同时,应竖牌警告他人勿入。并为有关部门提供资料及协作。
若仅微量EB排入下水道并被及时发现,在确保安全的情况下可由实验室熟知EB危害的人员进行清理。当然,清理EB的人员是必须经过安全培训,并有防范意识和相应的处理装置。如果实验室的人员未经培训或没有处理装置,请相关部门进行处理。
净化处理:在清理微量洒落的EB时,需全程穿着防护服(按上文所描述的“安全预防措施”)。用紫外灯照射确定污染的位置。EB的荧光是很容易看到的。如果洒落的EB是粉末状,用湿纸巾擦拭后并按程序清理。如果洒落的是液体,用干纸巾吸干后再用UV光检查残余的EB,然后按程序清理。
当准备或使用除污剂时配戴全面防护装备(实验服、手套和防护镜)。在用EB前,需预先准备好除污剂:4.2克亚硝酸钠(NaNO2,CAS # 7362-00-0)和20毫升的次磷酸(50%) (H3PO2, CAS# 6303-21-5),加入300毫升水。
1)用纸巾蘸取去污剂擦洗被污染的区域,再用纸巾加自来水清洗5次,每次实用的纸巾都必须是干净未污染的。
2)用紫外光检查已清洗的区域,以确保所有EB被清除。必要时可重复步骤1。如果酸可能损害被污染的表面,可用适量自来水稀释去污剂后再使用。
3)将所有使用过的纸巾用去污剂浸泡1小时,取出并将附着的去污剂拧干收回容器内。被处理时使用的手套和其他物件可双层包裹再扔弃。
4)在去污剂的容器上标上EB去污剂,并注明成分。将去污使用过的物件打包,后续处理程序如下。
处理EB的其他方法
凝胶电泳可改用低毒性的其他材料来替代EB(
例如,可用SYBRSafeTM 对DNA凝胶染色),以减少在实验室里可能发生的危险。处置EB的替代品也需有相应部门决定其处理方法后再做废弃处理。如有任何疑问,请该部门。

文章关键词:凝胶电泳

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